東莞電泳加工起決定性的幾個(gè)因素 1.電場(chǎng)強(qiáng)度 電場(chǎng)強(qiáng)度是指每釐米的電位梯度(電勢(shì)梯度)。電場(chǎng)強(qiáng)度對(duì)泳動(dòng)速度起著重要的功用。電場(chǎng)強(qiáng)度愈高,則帶電顆粒泳動(dòng)越快。例如濾紙電泳時(shí),在濾紙二端相距25 cm處測(cè)得電位降為250V,則電場(chǎng)強(qiáng)度為250/25=10V/cm。根據(jù)電場(chǎng)強(qiáng)度的不同,濾紙電泳可分為: (1)常壓(100-500V)電泳。其電場(chǎng)強(qiáng)度為2-10V/cm,分離時(shí)間較長(zhǎng),從數(shù)小時(shí)到數(shù)天,適合分離蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)。 (2)高壓(2000-10000V)電泳。其電場(chǎng)強(qiáng)度為50-200V/cm,電泳時(shí)間很短,有時(shí)只需幾分鐘。多用於分離胺基酸、核甘酸、醣類(lèi)等小分子物質(zhì)。 2. 溶液pH 東莞電泳加工為使電泳時(shí)pH恆定,必須採(cǎi)用緩衝液作為電極緩衝液,溶液的pH值決定帶電顆粒的解離程度,亦即決定其所帶電荷的多少。對(duì)蛋白質(zhì)而言,溶液pH值離等電點(diǎn)(pI)越遠(yuǎn),則顆粒所帶的淨(jìng)電荷越多,泳動(dòng)速度也月快;反之,則越慢。因此分離某種蛋白質(zhì)混合液時(shí),應(yīng)選擇一個(gè)合適的pH,使欲分離的各種蛋白質(zhì)所帶的電荷數(shù)量有較大的差異,更有利於彼此的分開(kāi)。 3. 電滲現(xiàn)象 東莞電泳加工液體在電場(chǎng)中,對(duì)於一個(gè)固體支持物的相對(duì)移動(dòng),稱(chēng)為電滲(electrosmosis)現(xiàn)象。。例如濾紙電泳,由於濾紙上吸附OH-離子帶負(fù)電荷,而與紙相接觸的水溶液帶正電荷,液體便會(huì)向負(fù)極移動(dòng),並攜帶顆粒同時(shí)移動(dòng)。所以電泳時(shí),顆粒泳動(dòng)的表面速度、顆粒本身的泳動(dòng)速度,等於電滲攜帶顆粒的移動(dòng)速度之和。若顆粒原來(lái)向負(fù)極移動(dòng),則其表觀速度將比泳動(dòng)速度快;若原來(lái)向正極移動(dòng),則其表面速度(apparent velocity)將比泳動(dòng)速度慢。為校正這一誤差,可用中性物質(zhì)糊精(dextrin)、蔗糖或葡萄糖(dextran)等與樣品同時(shí)做濾紙電泳,然後將其移動(dòng)距離自實(shí)驗(yàn)結(jié)果中除去。 |
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